Giemsa Banding


Giemsa Banding is the most frequently used banding technique in cytogenetic laboratories. Chromosome G banding is usually performed either by the usage of trypsin (which removes chromosomal proteins) or by incubation  in hot salt solutions (60°C) and then staining with Giemsa. Each chromosome pair stains in a distinctive pattern of light and dark bands. The dark bands are called G bands, and roughly correlate to base-pair composition (GC or AT) and repetitive DNA sequences. (http://uvmgg.wikia.com/wiki/Chromosome_banding)

در نخستین مرحله از رشد دانش سیتوژنتیک، روش های رنگ آمیزی کروموزوم ها بصورت توپر ابداع شد که کروموزوم ها بصورت دو شاخه نمایان می شدند. در این روش فقط امکان تعیین تعداد کروموزوم ها وجود داشت و تفکیک کروموزوم ها بطور دقیق میسر نبود. در عمل اشکالاتی در تعیین علت بسیاری از بیماری های کروموزومی ناشی از ناهنجاری های ساختاری ریز وجود داشت. بعدها با کاربرد سایر ترکیبات رنگ امیزی و روش نواربندی نشان دادند که کروموزوم ها بصورت نوارهای تاریک و روشن درخشانی رنگ می گیرند. رنگ پذیری و محل نوارها و همچنین شدت درخشندگی آنها در کروموزوم های مختلف با هم متفاوت است، اما برای هر کروموزوم مشخص و تقریبا همیشه ثابت است. نوار (بند) قسمتی از کروموزوم است که بطور واضح از ناحیه مجاور خود به علت رنگ پذیری بیشتر یا کمتر متمایز است. نواري كه در يك روش رنگ آميزي رنگ تيره به خود مي گيرد ممكن است در رنگ آميزي ديگر كاملا رنگ پريده يا بيرنگ باشد. كروموزومها از نوارهاي تيره و روشن پيوسته به هم تشكيل شده اند و بين آنها فاصله وجود ندارد. چندى بعد، مشخص شد که اگر كروموزومها را پيش از رنگ آميزي با ماده رنگي گيمسا به وسيله موادي مانند تريپسين يا اوره كه پروتئين ها را تجزيه می كنند، آماده كنيم، كروموزوم ها به صورت نوارهاي تاريك و روشن رنگ مي گيرد. اين روش رنگ آميزى كه به روش نوارى گيمسا يا G مشهور است، ثابت است و تهيه عكس از آن ساده تر است. روش نوارى G در بسياري از آزمايشگاه هاي سيتوژنتيك روش انتخابى رنگ آميزي است. استفاده از روش نواري در مقايسه با روش سنتى اوليه كه در آن كروموزوم ها به صورت دو رشته توپر و يكنواخت در مي آيند، امتيازات بسياري دارد.